TGF-β1诱导肌成纤维细胞转化相关调节蛋白的蛋白组学筛选与验证
【摘要】 目的探讨双向凝胶电泳技术筛选及鉴定转化生长因子-β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的差异蛋白质。方法将大鼠原代肺成纤维细胞分为对照组及5ng/mlTGF-β1诱导组（1、24h），以双向凝胶电泳筛选差异蛋白，分离并进行质谱鉴定。以Westernblot法、免疫荧光染色、免疫组织染色对5ng/mlTGF-β1诱导（6~48h）肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中差异蛋白[RhoGDP解离抑制因子α（RhoGDIα）]进行验证并对矽肺纤维化相关指标[α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和I型前胶原（procollagen-I）蛋白]进行检测。通过建立矽肺大鼠模型对肺组织中差异蛋白进行验证并对矽肺纤维化相关指标进行检测。结果经蛋白组学技术筛选出TGF-β1诱导的大鼠原代肺成纤维细胞的9个差异蛋白，与对照组相比，TGF-β1诱导组有8个蛋白点表达上调，1个蛋白点表达下调，其中RhoGDIα表达上调（P<0.05）。Westernblot
