生物
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目的100084;100700)对比分析早发性卵巢功能不全(POI)小鼠模型三种常用造模方法的差异,探索符合POI临床特征的造模方法。方法将96只动情周期规律的ICR小鼠随机分为4组:A对照组、B雷公藤组、C二氧化乙烯46和76天随机处死基环己烯(VCD)组、D半乳糖组。适应性喂养后,分别给予不同造模干预,分别于干预后第16、各组8只小鼠,检测小鼠血清性激素、观察卵巢和子宫病理改变等。结果著差异;各模型组均出现动情周期紊乱,对照组则阴性。结论各模型组小鼠E2、卵泡数与对照组有显VCD腹腔注射法可损伤小鼠卵巢功能,造成小鼠POI模型;此造模方法简便易行、成功率高,在三种造模方法中成模更为理想,可推广。
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该研究构建了靶向CD138的第四代CAR-T细胞(分泌IL-7和CCL19),通过与靶向CD138的第二代CAR-T细胞进行生物学功能比较,探讨第四代CAR-T细胞应用于临床的优势。使用慢病毒转染健康人外周血的T细胞制备出靶向CD138的第二代和第四代CAR-T细胞,CFSE标记法检测T细胞的增殖能力,Transwell实验检测T细胞的趋化能力,ELISA检测细胞因子分泌水平,流式细胞术检测T细胞的CAR表达率和亚型。荧光素酶生物发光法检测CAR-T细胞对多发性骨髓瘤细胞株的体外杀伤功能;构建人多发性骨髓瘤NCG小鼠模型,通过生物发光成像系统监测CAR-T细胞输注后小鼠肿瘤的消退情况。结果显示,靶向CD138的第四代CAR-T细胞(CD138-BBZ-7×19)在体外的生物学功能优于第二代CAR-T细胞(CD138-BBZ),而且在人多发性骨髓瘤动物模型中具有明显的抗肿瘤作用。
理解环境因子对物种空间分布的影响,评价栖息地适宜性现状并预测潜在分布区,对野生动物的管理和保护具有重要意义。华南梅花鹿(Cervuspseudaxis)属国家I级重点保护野生动物,现仅分布于安徽、浙江、江西等狭小片区内。浙江清凉峰自然保护区千顷塘区域是华南梅花鹿的重要分布区,但其面积较小,严重限制了华南梅花鹿的种群发展,亟需对千顷塘及周边区域的栖息地质量进行评价,为华南梅花鹿的保护和野外放归提供科学依据。利用红外相机监测千顷塘区域华南梅花鹿的分布,结合遥感等技术手段获得地形、植被、水源以及人为干扰等8种环境因子,利用MaxEnt构建华南梅花鹿栖息地适宜性模型,对以千顷塘为中心50km×50km的范围进行栖息地适宜性评价。研究结果表明,华南梅花鹿倾向于选择海拔1050-1240m范围内,距道路100-900m和距人口聚居区3200-3800m的相对平缓地带。千顷塘区域华南梅花鹿栖息地保护较好,适宜栖息地2面积为2224hm,占该区域39.1%。千顷塘周边适宜性较高的区域主要为位于其西南部约10km的山区,该区域为华南梅花鹿2提供了3253hm的潜在适宜栖息地。建议降低保护区千顷塘区域内的
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目的检测重组结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,Mtb)融合蛋白Ag85B-ESAT6(Antigen85B,6-kDaearlysecretoryantigenictarget,AE)和热休克蛋白X(heatshockproteinX,HspX)与氢氧化铝和聚肌胞苷酸(Polyinosinic-polycytidylicacid,polyI∶C)构建的新型结核病亚单位疫苗AEH/Al/IC在小鼠中的免疫原性。方法用疫苗(AEH/Al/IC)和佐剂(Al/PolyI∶C)分别免疫雌性BALB/c小鼠3剂次,每剂次间隔10d。末次免疫后第10天,经ELISA检测小鼠血清中抗原特异性IgG、IgG1和IgG2a的抗体效价,经酶联免疫斑点试验(enzyme-linkedimmunospot,ELISPOT)检测小鼠脾细胞分泌抗原特异性IFN-γ和IL-2的细胞频数,经ELISA检测小鼠脾细胞抗原特异性IFN-γ、IL-2和TNF-α的分泌量。结果与佐剂组相比,疫苗组诱导小鼠产生了高水平的AE和HspX特异性抗体;疫苗组诱导小鼠产生的AE和HspX特异性IFN-γ
四川省快速的经济发展和城镇化进程,引发了许多生态环境问题,评价其生态健康状况对区域可持续发展具有重要的意义。基于2000-2016年间四川省社会、经济、农业、生态等市级数据,以及降尺度模型获取的县级数据,建立压力-状态-响应模型,分市级和县级2种尺度对四川省区域的生态系统健康进行综合评价和分析。结果表明:在2000-2016年间,四川省生态系统健康状况整体得分从0.610上升到0.687,整体的生态状况越来越好,但区域之间的发展极不平衡,东部地区优于西部地区,成都市的优势突出,与其他地区的差距明显;对各县的生态系统健康状况评价等级为“不健康”及“病态”的县占总数的27.9%,一半左右的县在“正常”等级以上,等级为“病态”的县主要集中在甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州,应对川西北部的生态健康状况引起足够的重视。
目的探讨丹参注射液(Dansheninjection,DSI)对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠模型。大鼠分成6组:对照组(Control组)、模型组(Model组)、DSI低中高剂量组(1、2、4ml/kg)和阳性对照组。检测大鼠血液动力学参数;HE和TUNEL染色观察心肌损伤;ELISA检测炎症和氧化应激指标含量;免疫组化检测心肌组织中增殖蛋白表达;蛋白印迹法检测心肌组织中凋亡、增殖及通路蛋白表达水平。结果与模型组相比,丹参注射液改善脓毒症大鼠心肌损伤,增加平均动脉压、心率和左室收缩压,降低心肌细胞凋亡和cl-caspase-3、cl-caspase-9、Bax表达,增加Bcl-2表达,增加心肌组织Ki67和PCNA表达,抑制TNF-α、IL-6和IL-1β产生,增加抗氧化酶SOD含量,降低氧化产物MDA含量,还增加抗氧化酶Nrf2、HO-1和NQO1表达,下调炎症通路蛋白TLR4和P-P65。结论丹参注射液可能通过Nrf2和TLR4信号通路抑制脓毒症大鼠心肌损伤。
线粒体作为植物细胞的能量代谢中心,在植物响应逆境胁迫中有重要的作用。该研究基于雪莲(Saussureainvolucrata)、番茄(Lycopersiconesculentum)和拟南芥(Arabidopsisthaliana)三种不同低温耐受性植物的低温转录组。通过blast比对和数据库检索筛选相关物种的线粒体基因,使用PlantCARE在线网站分析启动子,使用mega7软件对系统发育树构建分析。结果表明:通过差异表达基因筛选,分别在雪莲、拟南芥、番茄中筛选出2、24、15个显著差异表达基因,主要包括线粒体核糖体亚基和电子传递链各复合体亚基,其中部分基因的低温差异表达情况如NAD1和NAD5,可能与植物的低温适应性有关;通过表达模式的聚类分析,雪莲与拟南芥在基因的表达模式上相对于番茄更为相近,且不同类别的基因表达模式在不同物种间差异较大;雪莲与其他菊科植物的呼吸链相关基因的蛋白序列具有很大差异,与万年藓(Climaciumdendroides)、牛舌藓(Anomodonminor)等高山植物的进化距离较近。在整体上拟南芥、番茄和雪莲三种植物线粒体基因在低温响应上具有很大差异,表明线
前期研究发现白桦锌指蛋白BpZFP4基因响应多种非生物逆境胁迫。为了深入研究其调控机制,本研究利用染色体步移技术克隆了该基因上游1360bp的启动子区域,序列分析结果表明该区域含有多个逆境响应顺式作用元件、激素响应元件、光响应以及病原菌和损伤响应元件等。在此基础上,构建了BpZFP4启动子5'-端一系列缺失片段融合GUS报告基因的表达载体。通过对系列缺失突变体在正常条件以及渗透胁迫、盐胁迫和脱落酸(ABA)处理条件下的GUS基因表达分析,鉴定得到BpZFP4启动子对干旱、盐和ABA应答响应的主要调节区域及可能的顺式作用元件。本研究结果为进一步探究BpZFP4基因应答非生物胁迫和信号分子刺激的调控机理提供了重要的理论依据。
于2013-2014年间在海坛岛长江澳沙滩采样,对小型底栖动物的类群组成、丰度及分布,自由生活海洋线虫(简称海洋线虫)群落的优势属、摄食类型、年龄结构及性比、物种多样性等方面进行研究。结果表明:小型底栖动物年平均丰度为(810.87±696.75)个/10cm2。在鉴定出的16个类群中,海洋线虫的丰度占小型底栖动物总丰度的52.36%,其次为腹毛虫,占21.14%。22海洋线虫的年平均丰度为(424.54±400.23)个/10cm,季节变化总趋势为夏季((783.45±336.45)个/10cm)>春季((600.67±309.42)个/10cm2)>秋季((298.26±424.57)个/10cm2)>冬季((113.05±95.79)个/10cm2)。4个季度共鉴定出海洋线虫105种或分类实体,隶属于75个属,26个科。4个季度数量百分比超过5%的优势海洋线虫属有10个,分别是Axonolaimus、Theristus、Metachromadora、Mesacanthion、Rhynchonema、Epacanthion、Microlaimus、Viscosia、Lauraton
为了解探照灯和测报灯两种光源对金龟子的诱捕效果,2015-2018年,在漂河市农业科学院五里岗试验基报灯,对金龟子种群进行了诱捕监测。结果表明:暗地设置探监测到的暗龟子的优势种。探金龟年度金龟丽金龟7±7.80d,年均诱报上灯金河报灯多出24137.75±12724.78头,占金龟子总量的百分比增加20.8±4.4(SE);探照灯监测到的铜绿丽金龟年度首现日比测报灯晚5±3.60d,年均诱捕数量比测报灯减少1793.75±504.02头,占金龟子总量的百分比减少12.4±1.6;(380~680nm)的探照灯对暗丽金龟诱捕作用
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我国部分自然保护区中拥有大面积草原,但由于过度放牧,面临草原面积减少、质量下降等问题,其重要原因之一是缺少合理的补偿标准导致牧民生计得不到有效保障,偷牧行为屡禁不止。研究制定自然保护区的退牧还草生态补偿标准、完善补偿机制,对于提高我国自然保护区内草原的生态环境质量、改善牧民生计具有重要意义。以我国自然保护区草原生态环境破坏的典型案例---吉林向海国家级自然保护区为例,构建自然保护区退牧还草生态补偿标准制定框架,包括识别影响保护区牧民退牧还草意愿的关键因素,遴选生态补偿标准计算方法;根据草原承包经营权、保护区功能分区、草原利用情况等对补偿客体进行分类;制定针对不同客体的多种补偿标准方案,并提出其优先序。研究结果显示:影响向海国家级自然保护区牧民退牧还草的关键因素为文化程度、务农人口比例、原有牲畜数量和已退养牲畜数量。核心区、缓冲区内未承包草原放牧的牧民的最佳补偿-1-1-1-1标准为833元羊单位a;核心区、缓冲区内承包草原放牧的牧民的最佳补偿标准为913元羊单位a;核心区、缓冲区内承-1-1包草原未放牧的牧民的最佳补偿标准为120元羊单位a;实验区牧民的最佳补偿标准则在核心区、缓冲区三
目的在体外探究低氧对巨噬细胞外泌体分泌的影响及对骨肉瘤细胞顺铂耐药性的改变。方法Transwell侵袭实验检测不同氧浓度(1%O2的低氧与常氧)条件下骨肉瘤细胞MG63对巨噬细胞的趋化能力;在低氧与常氧条件下将MG63与巨噬细胞进行共培养,流式细胞术及RT-PCR检测巨噬细胞的分化;分离纯化来源于不同氧浓度条件下培养的M2型巨噬细胞外泌体,利用透射电镜、纳米粒径、Westernblot进行鉴定,双免疫荧光进行示踪MG63对外泌体的摄取;克隆形成实验及流式细胞术检测来源于不同氧浓度下的巨噬细胞外泌体对MG63的增殖、凋亡影响;CCK-8检测来源于不同氧浓度下的巨噬细胞外泌体对MG63顺铂耐药性的影响。结果低氧能够促进骨肉瘤细胞对巨噬细胞的趋化能力,并进一步诱导巨噬细胞向M2型分化;成功分离不同氧浓度下培养的M2巨噬细胞外泌体,且低氧能够显著上调巨噬细胞对外泌体的分泌;低氧能够明显上调巨噬细胞外泌体对骨肉瘤细胞增殖能力的促进作用,抑制骨肉瘤细胞发生凋亡,并上调骨肉细胞对顺铂的耐药性。结论在体外低氧能够促进骨肉瘤细胞对巨噬细胞的趋化能力,并进一步通过诱导巨噬细胞向M2型分化及提高M2型巨噬细
由念珠菌感染引起的侵袭性念珠菌病治疗困难、死亡率高,是临床一大难题。氟康唑是目前治疗该病的一线用药,但近年来耐药菌株逐渐增多,治疗困难。因此,开发新的有效抗真菌药物或发现可提高现有抗真菌药物活性的化合物十分必要。通过体外抗真菌药物敏感性试验,我们发现TOR通路抑制剂ridaforolimus具有抗念珠菌作用。随后我们通过纸片法及微量液基稀释法评价该化合物单独或与氟康唑联合对念珠菌的抗菌效果。结果表明ridaforolimus对念珠菌有杀伤作用,在与氟康唑联合时增强了氟康唑的抗念珠菌能力,逆转了白念珠菌对氟康唑的耐药,并将氟康唑由抑菌剂转化为杀菌剂。本研究为ridaforolimus作为新型抗真菌药及氟康唑增敏剂提供了一定理论基础。
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