低氧对巨噬细胞外泌体的表达及其对骨肉瘤细胞的化疗抗性影响的体外研究
【摘要】 目的在体外探究低氧对巨噬细胞外泌体分泌的影响及对骨肉瘤细胞顺铂耐药性的改变。方法Transwell侵袭实验检测不同氧浓度（1%O2的低氧与常氧）条件下骨肉瘤细胞MG63对巨噬细胞的趋化能力；在低氧与常氧条件下将MG63与巨噬细胞进行共培养，流式细胞术及RT-PCR检测巨噬细胞的分化；分离纯化来源于不同氧浓度条件下培养的M2型巨噬细胞外泌体，利用透射电镜、纳米粒径、Westernblot进行鉴定，双免疫荧光进行示踪MG63对外泌体的摄取；克隆形成实验及流式细胞术检测来源于不同氧浓度下的巨噬细胞外泌体对MG63的增殖、凋亡影响；CCK-8检测来源于不同氧浓度下的巨噬细胞外泌体对MG63顺铂耐药性的影响。结果低氧能够促进骨肉瘤细胞对巨噬细胞的趋化能力，并进一步诱导巨噬细胞向M2型分化；成功分离不同氧浓度下培养的M2巨噬细胞外泌体，且低氧能够显著上调巨噬细胞对外泌体的分泌；低氧能够明显上调巨噬细胞外泌体对骨肉瘤细胞增殖能力的促进作用，抑制骨肉瘤细胞发生凋亡，并上调骨肉细胞对顺铂的耐药性。结论在体外低氧能够促进骨肉瘤细胞对巨噬细胞的趋化能力，并进一步通过诱导巨噬细胞向M2型分化及提高M2型巨噬细
