RASSF1A基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及对细胞增殖凋亡、体内成瘤能力的影响观察
【摘要】 目的观察Ras相关区域家族1异构体A(RASSF1A)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及对细胞增殖、凋亡、体内成瘤能力的影响，并探讨其作用的可能机制。方法取MCF-7细胞，分别感染RASSF1A过表达慢病毒oe-RASSF1A和空白载体慢病毒vector，记为oe-RASSF1A组和vector组。两组细胞继续培养72h，采用qRT-PCR法检测两组细胞中的RASSF1AmRNA。两组细胞在培养24、48、72、96h时，采用MTS法观察两组细胞增殖能力(以OD值表示细胞增殖能力)。两组细胞继续培养72h，采用流式细胞仪测算各细胞周期比例。两组细胞继续培养72h，采用流式细胞仪测算细胞凋亡率。两组细胞继续培养72h，取1×107个细胞重悬于100μLPBS中，分别注射入10只4周龄雌性裸鼠右侧腋下，常规饲养4周后处死，解剖瘤体并称重，以瘤体重表示体内成瘤能力。两组细胞继续培养72h，采用WesternBlotting法检测两组细胞中的RASSF1A、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(pPI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(pAKT)蛋白。结果oe-RA
