沉默BaxInhibitor-1基因对子宫肌瘤细胞凋亡的影响及机制研究
【摘要】 目的在子宫平滑肌瘤中探究Bax抑制因子1(Baxinhibitor-1,BI-1)的表达及其对子宫平滑肌瘤细胞的作用与相关机制。方法应用RT-PCR及Westernblot实验检测20对子宫平滑肌瘤组织样本与瘤旁组织中BI-1的mRNA及蛋白表达;分离培养原代子宫平滑肌瘤细胞并应用α-Actin免疫细胞染色进行鉴定;应用siRNA技术将靶向沉默BI-1的si-BI-1及阴性对照序列si-NC转染入上述分离培养的子宫平滑肌瘤细胞中,并将细胞分为3组,Control组、si-BI-1组和si-NC组;分别应用CCK-8、AnnexinV-FITC及JC-1与流式细胞术分析沉默BI-1对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位及细胞中Ca2+浓度的影响,最后应用Westernblot实验检测沉默BI-1对子宫肌瘤细胞中Cyt-C及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Cleavedcaspase-3表达的影响。结果与瘤旁组织相比,BI-1在子宫肌瘤中的mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.05);成功分离培养纯度较高的原代子宫肌瘤细胞;与Control组细胞相比,沉默BI-1基因表达不影响子宫平滑肌瘤