生物分离法制备细胞色素C质量的影响因素

【摘要】 细胞色素C为临床上应用广泛的生化药品。为了提高细胞色素C的质量,对制备过程中影响细胞色素C)对不同工艺制备的细胞色素C进质量的因素进行考察,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(行纯度分析,并对SDS-PAGE图谱中约2.5×104的蛋白质进行液相色谱-串联质谱法()分析与鉴定。结)沉淀剂的传统工艺制备的细胞色素C样品除了有1.22×104果表明:在SDS-PAGE电泳图中,使用三氯乙酸(,还包括1个约2.5×104的蛋白分子;而不使用三氯乙酸沉淀剂的新工艺制备的细胞色素C样品,仅的细胞色素C,而未发现约2.5×104的蛋白。SDS-PAGE图谱中分子量2.5×104的蛋白分子的LC-MS/有1.22×104的细胞色素CMS分析与鉴定结果表明其与猪源细胞色素C覆盖率最大(达到76%),结合其分子量大小,可以证明该蛋白为细胞色素C二聚体。细胞色素C制备过程中三氯乙酸沉淀剂易导致细胞色素C形成二聚体,故三氯乙酸是影响细胞色素C质量的关键因素之一。