缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制
【摘要】 目的探讨缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法将传3代、对数生长期、生长状态良好的宫颈腺癌HeLa细胞接种于96孔板,分别给予50、100、150、200、250μmol/L氯化钴(CoCl2)干预,另设对照孔,不予CoCl2干预。干预24、48、72h,收集细胞,采用MTT法检测各孔细胞增殖抑制率。选取细胞增殖抑制率最低的CoCl2浓度作为后续构建细胞缺氧模型的最佳浓度。将HeLa细胞接种于6孔板,随机分为观察组和对照组,观察组通过CoCl2构建细胞缺氧模型,对照组常规培养,显微镜下观察继续培养0、48h划痕距离,计算细胞迁移率。将HeLa细胞接种于6孔板,通过CoCl2构建细胞缺氧模型,分别于CoCl2干预0、24、48、72h收集细胞,采用RT-PCR、Westernblotting法检测缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)mRNA和蛋白表达。结果50、100μmol/LCoCl2干预24h能够促进HeLa细胞增殖(P均<0.05),且以100μmol/L时效果更强,故后续选择100μmol/LCoCl2构建细胞缺氧模型。