BDNF干预MSCs源性外泌体减轻过氧化氢致PC12细胞氧化应激损伤
【摘要】 目的探讨经脑源性神经营养因子(BDNF)干预后的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)源性外泌体对H2O2损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用。方法全骨髓培养法提取大鼠MSCs,取P3代分为对照组及干预组(培养基中加入30ng/mLBDNF),分别收集细胞上清,超速离心法分离并纯化外泌体,通过透射电镜观察鉴定外泌体形态;用Westernblot鉴定外泌体表面标志蛋白CD9、CD63;实验将嗜铬细胞瘤细胞PC12分为4个组:对照组、H2O2组、MSCs外泌体组和BDNF-MSCs外泌体组,前2组培养基中加入PBS,后2组加入相应外泌体(MSCs外泌体组和BDNF-MSCs外泌体组外泌体蛋白浓度均为50μg/mL)均预处理12h,后3组在培养基中加入H2O2(0.521mmol/L)对PC12建立氧化应激的细胞损伤模型;于10h后以CCK-8法检测细胞活性,检测活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SO