靶向叉头框蛋白 J2 的 CRISPR / Cas9 基因敲除质粒的 构建及其对肝癌细胞转化生长因子 β/ Smads 表达和增殖的影响
【摘要】 目的构建靶向叉头框蛋白)基因敲除质粒,探讨干扰Cas9白(转化感受态大肠埃希菌,挑取单克隆扩增提质粒FOXJ2)表达和增殖的影响TGF-β/SmadsJ2(基因后对小鼠肝癌细胞。方法设计小鼠FOXJ2FOXJ2)的规律间隔成簇短回文重复序列相关蛋白(/Hepa1-6的小向导的信号通路转化生长因子(sgRNA)序列,与RNAPX45848hSmads,对照组只转染空载体,Hepa1-6和的表达情况;基因敲除质粒TGF-β的达,同时检测到干扰了制组肝癌细胞的增殖能力明显提高CRISPR/Cas9FOXJ2MTT的细胞的后RT-PCR法检测干扰。检测对FOXJ2PX458-FOXJ2-sgRNAs利用脂质体将重组质粒细胞PX458-FOXJ2-sgRNAs的抑制作用,同时检测FOXJ2Hepa1-6后对肝癌细胞增殖能力的影响,其中质粒和FOXJ2。结果成功构建可以有效抑制PX458-FOXJ2-sgRNA2的表达均高于对照组,差异显著;并且3