天柱番鸭NPY基因克隆及其在组织中的表达分析
【摘要】 试验旨在克隆天柱番鸭神经肽YCneuropeptideY,NPY)基因,并分析其在天柱番鸭不同组织中的转录水平。以天柱番鸭产蛋期组织混合cDNA为模板,通过RT-PCR扩增天柱番鸭JPY基因的完整CDS区进行克隆测序,并结合生物信息学分析工具分析其同源性及遗传进化关系,同时进行NPY蛋白理化特性、亚细胞定位、信号肽、糖基化与磷酸化位点、二级结构、三级结构等预测,并对N8Y基因在天柱番鸭不同组织中的转录水平进行检测。结果表明,天柱番鸭JPY基因CDS区全长294bp,编码97个氨基酸,核昔酸序列与氨基酸序列同源性比对显示,N8Y基因在不同物种间具有一定的遗传多样性,与绿头鸭亲缘关系最近;NPY蛋白为酸性不稳定蛋白,存在1个信号肽(第1-28位氨基酸)亚细胞定位为100%位于细胞外;存在1个功能结构域PAH,同时含有2个O-糖基化和丰富的磷酸化位点,空间结构以-螺旋和无规则卷曲为主&实时荧光定量PCR结果表明JPY基因mRNA在天柱番鸭各组织中均有分布,在大脑中表达水平相对较高,在胰腺、腺胃中表达量次之,与其他组织间差异极显著(PC0.01),在肌