抗CD47单克隆抗体制备及其促巨噬细胞吞噬作用鉴定
【摘要】 目的:制备可识别肿瘤细胞表达CD47蛋白的抗CD47单克隆抗体，并鉴定其抗肿瘤作用。方法:利用BL21（DE3）原核表达系统表达CD47胞外段蛋白，利用Ni-NTA层析纯化表达蛋白。免疫BALB/c小鼠，制备并筛选分泌抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞株。利用正辛酸-硫酸铵沉淀方法纯化抗CD47单抗。利用流式细胞术检测纯化抗体的活性。利用巨噬细胞与肿瘤细胞共培养试验，检测抗CD47单抗的抗肿瘤作用。结果:表达并纯化了CD47胞外段蛋白，筛选到了分泌抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞株-7D4，流式细胞术检测结果显示，抗体具有结合肿瘤细胞的活性，但是对不同肿瘤类型细胞的结合效率存在差异。巨噬细胞与肿瘤细胞共培养试验发现，利用抗体封闭肿瘤细胞CD47信号后，可以增强巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。结论:抗CD47单抗-7D4可以促进巨噬细胞的吞噬作用，具有潜在应用价值。
