蛋白磷酸酶PHLPP2通过线粒体凋亡途径加重顺铂诱导的小鼠急性肾损伤
【摘要】 目的:研究Pleckstrin同原序列富亮氨酸重复片段蛋白磷酸酶(PHLPP2)在急性肾损伤(AKI)发生发展中的作用及机制;方法:将20只野生型C57BL/6(WT)小鼠与20只敲除PHLPP2(PHLPP2-/-)表达的转基因小鼠按是否使用顺铂(CDDP)处理进行分组,即WT对照组、WTCDDP处理组、PHLPP2-/-对照组和PHLPP2-/-CDDP处理组(每组10只)。3d后处死小鼠,RT-PCR及WesternBlot检测各组小鼠中PHLPP2mRNA及蛋白水平;免疫组织化学染色检测肾组织PHLPP2表达及定位;HE与TUNEL染色检测肾组织损害和细胞的凋亡情况;分离并鉴定小鼠肾小管上皮细胞(RTECs),透射电子显微镜观察RTECs中线粒体结构;JC-1法检测RTECs中线粒体膜电位变化;WesternBlot检测RTECs中促凋亡蛋白Bax、Caspase-3,及凋亡抑制蛋白Bcl-2和Akt的Thr308与