近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞分离培养及生物学特性
【摘要】 目的:建立近交系五指山小型猪(inbreedlineminiaturepigofWuzhishan，ILMW)脂肪间充质干细胞(adipose-derivedmesenchymalstemcells，ASCs)体外分离培养和鉴定方法。方法:选取6月龄健康ILMW3头，从颈部皮下无菌获取脂肪组织约100g，采用0.1%I型胶原酶消化组织，获得ILMW-ASCs，并进行体外培养和增殖;取第3，5，8，13代细胞进行如下实验:测量细胞大小，观察细胞形态，检测细胞表型、细胞周期、细胞凋亡，并进行细胞诱导分化和绘制细胞增殖曲线。结果:体外分离培养的ILMW-ASCs在体外贴壁，呈成纤维样或旋涡状生长;原代细胞培养36h出现贴壁，第5天进入对数增殖期，约7d后80%的细胞汇合。ILMW-ASCs细胞直径及体积分别为(17.00±0.54)µm和(2.58±0.24)×10–9L。细胞表面抗原CD29，CD44和CD90呈高表达，不同代数之间的差异不明显(均P>0.05);CD45，CD8a和HLA-DR呈低表达，与第3代相比，随着代数的增加细胞表面
