人工合成的亚硝基化合物MNNG致人胃黏膜上皮细胞恶性转化模型的建立及机制分析
【摘要】 目的建立人工合成的亚硝基化合物N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）暴露致人胃黏膜上皮细胞GES-1恶性转化的模型，并分析其作用机制。方法取GES-1细胞，分为空白对照组、溶剂对照组和MNNG诱导组。空白对照组正常培养，MNNG诱导组在培养基中加入2μmol/L的MNNG，溶剂对照组加入等体积的DMSO。常规培养4周。于实验第5周行病理染色观察三组细胞形态，细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Westernblotting法检测细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1表达，qPCR法检测LC3Ⅱ、Beclin1mRNA表达，裸鼠成瘤实验检测各组细胞成瘤能力。结果MNNG诱导组细胞体积增大，形态不规则，排列紊乱，部分细胞呈团块状生长，部分细胞呈梭形。与空白对照组相比，MNNG诱导组细胞克隆形成数目明显增多，细胞迁移速度增高（P均<0.05），LC3Ⅱ、Beclin1蛋白及mRNA表达水平降低（P均<0.05），裸鼠成瘤能力增加。结论成功建立MNNG致人胃黏膜上皮细胞恶性转化模型，其机制可能与自噬相关。
