从Wnt通路抑制因子表观遗传修饰调控研究重楼皂苷Ⅶ抗结直肠癌机制
【摘要】 目的从Wnt通路抑制因子表观遗传修饰调控研究重楼皂苷Ⅶ(PPLVⅡ)抗结直肠癌机制。方法实验分三组,空白对照组、结直肠癌模型组和PPLVII治疗组。采用TUNEL法检测小鼠的细胞凋亡情况,TOPglow/FOPglowTCF试剂盒用于检测Wnt信号传导途径活性,应用双抗体夹心法ELISA(sandwichELISA)检测cleavedcaspase-3、cleavedcaspase-8、cleavedcaspase-9、Bax、Bcl-2以及Cdk-4、Cdk-6、CyclinD1和p21的表达,用免疫蛋白印迹检测细胞中的β-连环蛋白,实时荧光定量PCR检测干细胞相关基因OCT4、SOX2、c-Myc和TCF4的表达,检测lgG、β-catenin和H3k9Ac与MMP-9启动子的结合。结果TUNEL免疫组织化学分析与对照组相比,PPLVII诱导肿瘤细胞凋亡;PPLVII治疗后cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-