MiR-124对食管癌细胞增殖和侵袭的作用及机制研究
【摘要】 『目的]检测miR.124及其靶基因CREBj在食管癌组织中的表达情况,探讨miR.1241CREBl在人食管鳞癌细胞KYSE.150体外增殖和侵袭中的作用及机制。[方法]通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测32例食管鳞状细胞癌(ESCC)2H织及周围正常组织的miR.124和CREBl表达。Targetscan分析miR.124与CREBl的结合位点,荧光素酶基因报告实验验证miR.124与CREBl是否结合:过表达或抑制miR.124后,采用Westernblot检测KYSE一150细胞中CREBl的表达;在KYSE.150细胞中转染miR.124mimic为miR.124mimic或转染miR.124抑制剂为anti.mi。R124,转染后24h、48h、72h收集细胞计数,检测细胞增殖情况;转染24h后通过体外侵袭实验检测过表达或抑制miR一124对KYSE一150细胞侵袭的影响。在KYSE.150细胞中转染CREBlsiRNA后24h、48h、72h收集细胞计数,检测细胞增殖情况;转染CREBlsiRNA24h后检测KYSE一150细胞侵袭