从“V2R-cAMP-PKA-AQP2”通路探讨肾气丸上调NRK细胞AQP2表达的作用机制
【摘要】 目的:观察肾气丸对NRK细胞水通道蛋白2（AQP2）表达的影响，探讨肾气丸在NRK细胞“V2R-cAMP-PKA-AQP2”通路上的主要作用环节。方法:首先采用H-89、SQ22536、Tolvaptan分别抑制蛋白激酶A（PKA）、环磷酸腺苷（cAMP）及V2R，再合用cAMP抑制剂SQ22536与PKA激动剂8-Br-cAMP干预NRK细胞，通过qPCR法和WesternBlot法观察NRK细胞AQP2mRNA表达水平及AQP2、p-PKA蛋白表达的变化。结果:10%肾气丸含药血清能显著上调NRK细胞AQP2mRNA和蛋白的表达（P<0.01，P<0.05），加入PKA抑制剂H-89、cAMP抑制剂SQ22536或V2R拮抗剂Tolvaptan后，10%肾气丸含药血清促进AQP2、p-PKA表达的作用被显著抑制（P<0.01，P<0.05）;SQ22536能显著抑制p-PKA、p-AQP2蛋白的表达（P<0.05），加入肾气丸含药血清或PKA激动剂8-Br-cAMP后，p-PKA、p-AQP2蛋白表达均显著上调（P<0.01，P<0.05）。结论:V2R和PKA可能是肾气丸上
