miR-17靶向调控Akt2在抑制宫颈癌细胞增殖中的作用及机制研究
【摘要】 目的探讨miR-17在宫颈癌组织以及细胞株中的表达情况,验证miR-17与Akt2之间是否存在靶向调控关系,探讨miR-17靶向调控Akt2在宫颈癌细胞增殖中的作用及机制研究。方法采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测23例宫颈癌患者以及正常组织中miR-17的表达,同时检测2株宫颈癌细胞系(siHa、Hela)及1株正常宫颈上皮细胞H8中miR-17的表达。分别将miR-17抑制物、模拟物(mimics)和对照经脂质体转染Hela细胞48h后,qRT-PCR检测转染效率,MTS法检测细胞增殖活力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,western-blot检测转染后下游Foxo1A以及Bcl-2蛋白的表达情况。TargetScan软件预测结果表明Akt2为miR-17的靶基因,构建含有野生型或突变型Akt2基因3`-UTR区域的双荧光素酶报告基因载体,分别检测野生型或突变型Akt2基因与miR-17mimics、抑制物以及