甘草酸对TGF-β1诱导的NRK-49F细胞活化及分泌细胞外基质的影响
【摘要】 目的探讨甘草酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)中纤维化相关因子表达的影响。方法体外培养NRK-49F细胞，不同浓度甘草酸干预细胞48h后，CCK-8法检测其对细胞增殖的影响，确定对细胞活性无显著影响的作用浓度。以10μg/LTGF-β1刺激NRK-49F细胞构建肾间质纤维化细胞模型，加入不同浓度甘草酸进行干预，免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1)表达情况。实时荧光定量PCR、WesternBlot法检测纤维化相关因子α-SMA、COL1、Ⅲ型胶原(COL3)mRNA及蛋白表达情况，以评价甘草酸对成纤维细胞活化及细胞外基质分泌的影响。结果CCK-8结果显示甘草酸在100~600μmol/L浓度范围内对NRK-49F细胞活性无影响。免疫荧光结果表明，加入甘草酸后可抑制α-SMA表达及COL1分泌，随甘草酸浓度增加，抑制作用增强。WesternBlot结果显示，与模型组相比，甘草酸干预可下调α-SMA
