条件性子宫细胞剔除的研究

【摘要】 为了研究体内细胞的功能和各种细胞之间的相互作用,试验研究了可以特异性消除特定细胞的条件性细胞剔除新方法。通过PRCre/+工具鼠与pCAG-loxp-STOP-loxp-DTR-2A-EGFP转基因小鼠(DTR小鼠)交配获得子宫特异表达白喉毒素受体(DTR)的转基因小鼠,经过PCR和琼脂糖凝胶电泳鉴定基因后,筛选出PRw+/pCAG-loxp-STOP-loxp-DTR-2A-EGFP雌性小鼠(PR-DTR小鼠)。以DTR小鼠和野生型小鼠(WT小鼠)作为试验对照组,利用免疫组织化学和Westernblotting检测子宫中绿色荧光蛋白(GFP)的表达。腹腔注射白喉毒素1ng/d,连续2d,观察PR-DTR小鼠、DTR小鼠和WT小鼠子宫的外部形态差异,并通过HE染色的方法观察子宫的内部形态。使用免疫组织化学方法检测注射白喉毒素后PR-DTR小鼠、DTR小鼠和WT小鼠子宫中叉头框蛋白A2(FOXA2)的表达。试验发现在小鼠子宫上皮、基质和肌层细胞中都有GFP的表达,注射白喉毒素后PR-DTR小鼠子宫红肿膨胀,DTR小鼠和WT小鼠子宫没有显著变化。HE染色