小鼠Cdc25B基因的真核表达载体构建及鉴定

【摘要】 目的构建含有小鼠基因的真核表达载体Cdc25BpcDNA3.1-3xflag-Cdc25B方法目的基因Cdc25B经化学合成后,定向克隆至()真核表达载体中,经过限制性内切酶行双酶切和测序鉴定,构建真核表达载体胞内白,利用。结果pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B检测到细胞内的表达Cdc25BWesternblotCdc25BpcDNA3.1-3xflag-Cdc25B的表达,并且测序结果与预期结果一致pcDNA3.1+,应用脂质体法转染真核表达载体构建成功,将其转染,并观察和验证其在真核细胞中的表达。进ApaⅠ检测细,提取细胞蛋细胞,通过细胞WesternblotHEK293KpnⅠ和HEK29348h。结论成功构建了真核表达载体pcD-NA3.1-3xflag-Cdc25B。