DHA对UVB和砷引起的DNA损伤的预防作用

【摘要】 目的探讨DHA对于紫外线B(UVB)照射和砷诱导的正常小鼠上皮细胞DNA损伤是否具有预防保护作用。方法采用不同浓度(25、50、75、100μmol/L)DHA处理小鼠上皮细胞株JB6,加入5μmol/L砷并进行UVB照射(照射能量为240mJ/cm2),将未进行UVB照射和砷处理的细胞设为空白对照组。MTT实验检测JB6细胞活性,免疫荧光实验检测γH2AX的表达,彗星实验检测DNA损伤程度,Westernblotting法检测DNA修复相关蛋白及抗氧化酶的表达水平并用DHE和DCF染色检测在此过程中活性氧簇(ROS)的产生水平。结果DHA在75、100μmol/L时能够降低UVB和砷联合作用诱导的细胞死亡;γH2AX的荧光染色及Westernblotting检测结果均显示,UVB和砷联合作用导致DNA损伤标志物γH2AX表达水平升高,而DHA预处理的细胞能够明显抵抗UVB和砷引起的γH2AX表达增加,且呈浓度依赖性。彗星实验结果显示