乙型丙型肝炎病毒合并感染细胞模型的建立
【摘要】 目的:利用慢病毒载体在可感染丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus，HCV）的Huh7.5.1细胞中过表达人肝细胞乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白（sodiumtaurocholatecotransportingpolypeptide，NTCP）编码基因，建立Huh7.5.1⁃hNTCP细胞模型，使其可以被HBV、HCV共同感染。方法:使用携带人NTCP编码基因、绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）基因、嘌呤霉素抗性基因的GV358重组慢病毒载体，以感染复数（MOI）50感染Huh7.5.1细胞。经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达人NTCP基因的Huh7.5.1⁃hNTCP细胞株，并通过Westernblot验证NTCP蛋白的表达。使用HepAD38细胞来源的HBV感染Huh7.5.1⁃hNTCP细胞，通过ELISA及qPCR等方法检测HBV感染后不同时间点乙肝病毒表面抗原（HB⁃sAg）、e抗原（HBeAg）的表达以及HBVDNA的复制。HBV感染后24h予以HCV⁃JFH1感染，检测合并感染状态下H
