过表达SPINK5对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响
【摘要】 目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal型5(SPINK5)在宫颈癌组织中的差异表达及其过表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法基于GEO数据库获取宫颈癌基因表达芯片GSE9750数据集,通过蛋白互作网络分析筛选出关键差异表达基因SPINK5。采用PCDNA3.1-SPINK5、PCDNA3.1-NC慢病毒稳定转染宫颈癌HeLa细胞,采用实时荧光定量PCR法、Westernblotting法鉴定转染效率。取上述转染细胞,分别记为观察组和对照组,采用MTT法检测细胞增殖活性,采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果在GSE9750数据集中共筛选出665个差异表达基因,蛋白互作网络分析确定宫颈癌组织SPINK5低表达。观察组SPINK5mRNA和蛋白相对表达量均明显高于对照组(P均<0.05)。观察组培养48、72h时细胞增殖活性明显低于对照组(P均<0.05);观察组细胞凋亡率明显高于对照组,细胞侵袭能力明显低于对照组(P均<0.05)。结论SPINK5在宫颈癌组织中低表达;过表达SPINK5能够抑制宫颈癌细胞增殖和