肺动脉平滑肌细胞自噬与合成分泌功能的关系
【摘要】 目的分离培养慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠原代肺动脉平滑肌细胞（PASMCs），以自噬增强剂及自噬抑制剂为工具药，测定PASMCs自噬相关基因的表达量及其合成分泌功能（IL⁃6、血小板源性生长因子:PDGF⁃AB分泌量）的变化，分析PASMCs自噬与其合成分泌功能的关系。方法（1）建立COPD大鼠模型，分离、培养原代COPD大鼠PASMCs，将第4、5代PASMCs用于后续研究;（2）实验分组:①对照组:不加入任何干预剂;②LPS组;③3⁃MA+LPS组;④Rapamycin+LPS组;⑤3⁃MA单独处理组;⑥Rapamycin单独处理组，48h后，以上每组做4个复孔，重复实验2次。各组分别于培养48h后，收集细胞或细胞培养上清液测定以下指标:①WesternBlot检测PASMCs自噬标记蛋白LC3⁃Ⅰ、LC3⁃Ⅱ和Beclin⁃1的蛋白表达量;②酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测各组培养上清液中IL⁃6及PDGF的含量变化。相关分析法分别分析自噬与合成分泌功能的相关性。结果（1）LPS诱导下大鼠PASMCs中自噬相关基因LC3⁃Ⅰ、LC3⁃Ⅱ及Beclin⁃1的表达量:LPS
