mtDNA氧化损伤在人视网膜血管内皮细胞高糖代谢记忆过程中的作用

【摘要】 目的探讨mtDNA氧化损伤在人视网膜血管内皮细胞(hRECs)高糖代谢记忆过程中的作用。方法选择30mmol·L-1葡萄糖的DMEM培养基作为正常培养基。将hRECs分为4组:空白对照组对hRECs不做特殊处理,用正常培养基培养;高糖诱导3h组用高糖作用hRECs3h,高糖诱导12h组用高糖作用12h,高糖诱导24h组用高糖作用24h,之后均转至正常培养基培养2d。采用流式细胞仪检测hRECs细胞凋亡情况及hRECs内活性氧自由基(ROS)含量,Westernblot检测hRECs细胞色素C蛋白表达,实时荧光定量PCR检测线粒体呼吸链复合物COX1mRNA的表达,ELISA法检测hRECs线粒体内mtDNA氧化损伤标志物8OHdG含量。结果流式细胞仪检测结果显示,对照组细胞凋亡率为6.94%。高糖诱导3h组、12h组及24h组细胞凋亡率分别为10.30%、12.08%、13.55%;高糖诱导24h组细胞凋亡率高于高糖诱导12h组,差异有统计学意义(P<0.05),高糖诱导12h组细胞凋亡率高于高糖诱导3