陆川猪PDK4基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析
【摘要】 试验旨在了解陆川猪丙酮酸脱氢激酶4(pyruvatedehydrogenasekinase4,PDK4)基因CDS区序列信息及其所编码蛋白的结构和功能，构建PDK4基因的真核表达载体，分析PDK4基因在陆川猪不同组织中的表达情况，以期为阐明PDK4基因在陆川猪生长发育过程中的分子机制奠定基础。采用RT-PCR技术扩增陆川猪皮下脂肪6784基因CDS区，利用生物信息学软件预测分析其结构与功能，并利用常规分子克隆技术将其插入真核表达载体中获得pEGFP-N1-PDK4,用脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞并观察荧光，用实时荧光定量PCR检测6784基因mRNA在陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪中的表达情况&结果显示，陆川猪6784基因CDS区全长1224bp,编码407个氨基酸，与NCJI上公布的野猪6784基因CDS区同源性达99.8%。对陆川猪6784基因所编码的蛋白进行生物信息学分析发现，其分子质量约为46.144k-原子总数为6509个，理论等电点(pI)为7.21,带正电荷和负电荷的氨基酸数均为42个&
