miR_9调控GOLPH3抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移

【摘要】 目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-9在食管癌中的表达水平及其对食管癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测食管癌患者癌组织及其癌旁组织中miR-9及高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因的表达水平;miR-9模拟物转染食管癌细胞系EC109,qRT-PCR检测miR-9的表达水平;MTT试验、平板克隆形成试验、Transwell迁移试验和流式细胞术检测过表达miR-9对EC109细胞生物学功能的影响。构建野生型和突变型GOLPH3双荧光素酶报告基因载体,并检测荧光素酶活性。qRT-PCR及westernblot检测过表达miR-9后,GOLPH3mRNA和蛋白质的表达水平。结果与癌旁组织相比,食管癌组织中miR-9的表达水平明显降低(P<0.01),而GOLPH3基因表达水平明显升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-9模拟物转染后,食管癌EC109细胞中miR-9的表达水平明显升高(P<0.01),且细胞增殖和迁移能力明显降低(P<0.01),其细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.01)。双荧光素酶报告实验、qRT-PCR