线粒体ATP敏感性钾通道在降钙素基因相关肽减轻新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用
【摘要】 目的评价线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP通道)在降钙素基因相关肽(CGRP)减轻新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法取原代培养的新生1~3dSD大鼠心肌细胞,在含有10%胎牛血清培养基中培养,细胞接种于6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为5组(n=10):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(AR组)、CGRP+缺氧复氧组(CGRP组)、CGRP+mitoKATP通道阻滞剂(5-HD)+缺氧复氧组(5-HD组)、CGRP+CGRP受体阻滞剂CGRP8-37+缺氧复氧组(CGRP8-37组)。除C组,其余4组均缺氧3h,复氧2h;CGRP组缺氧前2h加入终浓度为0.1nmol/LCGRP;5-HD组于缺氧前2.5h加入终浓度为500μmol/L5-HD,30min后加入终浓度为0.1nmol/LCGRP;CGRP8-37组于缺氧前2.5h加入终浓度为1nmol/LCGRP8-37,30min后加入终浓度为0.1nmol/LCGRP。于缺氧复氧后检测心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,JC-1荧光法测定线粒体膜电位(Δψm)的变化,即JC-1多聚体/