miR-93-5p通过靶向CDKN1A促进多囊卵巢综合征颗粒样瘤细胞KGN的生长增殖
【摘要】 目的:验证CDKN1A是miR-93-5p直接调控的靶基因,阐明miR-93-5p可通过靶向CDKN1A促进人卵巢颗粒样肿瘤细胞系KGN的生长增殖。方法:选取我院2016年6月-2019年6月期间确诊的40例多囊卵巢综合征(PCOS)患者作为研究对象,qRT-PCR检测PCOS病变卵巢组织和病灶旁正常卵巢组织(对照)中miR-93-5p和CDKN1A的表达水平。TargetScan软件用以预测miR-93-5p靶基因,并使CDKN1A所含3'-UTR克隆至目的基因下游(CDKN1A-wt或CDKN1A-mut),并分别与miR-93-5p模拟物(miR-93-5pmimics)以及其无关对照寡核苷酸序列(scramble)共转染,荧光素酶报告基因实验验证所预测的靶基因,qRT-PCR和Westernblot分别检测转染miR-93-5pmimics及其对照scramble-1、miR-93-5p抑制剂(miR-93-5pinhibitor)及其对照scramble-2