阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响

【摘要】 为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的£:N«C"亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaC"亚基基因,构建克隆质粒pMDlC-T-ENaC"对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮"ldosterone)和血管紧张素'"ngiotensin实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaC"亚基基因的表达情况,以确定EN0"对两种激素浓度变化的敏感性。结果显示,PCR扩增得到