新生SD大鼠心肌成纤维细胞的原代培养方法
【摘要】 目的探讨新生SD大鼠心肌成纤维细胞原代培养的方法。方法选取48h以内的新生SD大鼠,采用胰蛋白酶消化法分离心肌成纤维细胞进行体外培养,利用心肌成纤维细胞较心肌细胞贴壁时间短的特性,通过差速贴壁法分离纯化心肌成纤维细胞,采用倒置相差显微镜对细胞形态进行观察,并通过免疫组化染色对心肌成纤维细胞进行鉴定。结果心肌成纤维细胞呈长梭形、多角形或泡状生长,胞体相对心肌细胞较大,胞浆呈透明无色,细胞核较大,核呈色淡的椭圆形,多数细胞呈双核和三核。心肌成纤维细胞生长迅速,2~3d即可融合成片层,显微镜下细胞呈紧密排列状态,偶可呈现交叉、重叠生长,但一般无聚集成团生长,培养过程中细胞未见明显自发搏动。结论本实验方法是较为稳定理想的培养心肌成纤维细胞的方法,可获得高纯度心肌成纤维细胞。
