反义寡核苷酸下调miRNA-21表达对人结肠癌模型体内生长的作用
【摘要】 目的 探讨反义寡核苷酸(ASOs)下调微小RNA-21(miR-21)表达的效果及其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠皮下种植瘤生长的影响。方法 常规建立人HCT116结肠癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部分别注射p-miR-21-ASOs质粒和p-Cont质粒(100微克/只),并观察肿瘤生长变化。HE染色法观察肿瘤组织形态学变化;免疫组织荧光法检测Ki-67蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测miR-21成熟体及周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、CDK3、CDK4及CDK6的表达;Westernblot法检测总Akt、ERK1/2、p-Akt、p-ERK1/2蛋白的表达水平。结果 与p-Cont组相比,p-miR-21-ASOs组肿瘤生长显著受到抑制(P<0.05);肿瘤细胞大面积坏死、Ki-67表达显著减少(P=0.0074);miR-21和CDK2、CDK3、CDK4及CDK6的表达均显著下调(均P<0.05);肿瘤组织中p-Akt和p-ERK1/2蛋白表达下调(P<0.05)。结论 ASOs下调miR-21表达可以显著抑制人结肠癌细胞的体内生长。