抑制Aurora激酶B的表达可促进骨肉瘤143B细胞凋亡

【摘要】 目的探讨抑制Aurora激酶B(AURKB)诱导骨肉瘤143B细胞自噬对凋亡的影响及其潜在的分子机制。方法构建慢病毒载体(干扰慢病毒Lv/shAURKB和相应的空载慢病毒Lv/shScrambled),分别感染人源骨肉瘤细胞系143B细胞,并采用氯喹(CQ)进行干预24h,分别作为:AURKB慢病毒干扰组(plv/shAURKB组);阴性对照组(plv/NC组);plv/shAURKB+CQ组;空载慢病毒+氯喹处理组(plv/NC+CQ组)。RT-qPCR检测Lv/shAURKB慢病毒载体对AURKBmRNA的干扰效率。Westernblot检测AURKB、P62、LC3、Cleaved-caspase3、Bcl2、P-ULK1(Ser555)等蛋白表达水平。采用透射电镜和LC3双标荧光法示踪143B细胞内自噬小体并检测自噬水平,流式细胞术和Tunel实验检测细胞凋亡。免疫共沉淀检测AURKB蛋白与ULK1(UNC-51样激酶1)蛋白间的相互作用关系。结果plv/shAURKB组细胞中AURKB