慢病毒介导的AP-1基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡及Survivin表达影响的研究
【摘要】 目的探讨慢病毒介导的AP-1基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡以及Survivin表达的影响。方法基于RNA干扰技术构建慢病毒载体AP-1-shRNA，测定病毒滴度。实时荧光定量PCR及Westernblot验证并筛选AP-1-shRNA沉默AP-1效果。将沉默效果最佳的载有AP-1-shRNA的慢病毒感染SKOV3细胞作为实验组，未感染病毒及感染空载体病毒SKOV3细胞作为对照组，用MTT法及AnnexinV-APC观察SKOV3细胞增殖、凋亡情况，并用实时荧光定量PCR、Westernblot检测SKOV3细胞Survivin表达。结果经测序证实，成功构建AP-1-shRNA-1/2/3三组慢病毒，病毒滴度均大于2×108TU/mL。实时荧光定量PCR及Westernblot验证三组病毒均能在mRNA及蛋白水平沉默AP-1的表达，其中AP-1-shRNA-3沉默效果最佳，用于后续实验。沉默AP-1后，SKOV3细胞增殖受到抑制、凋亡增加、SurvivinmR-NA转录水平和蛋白表达水平降低。结论慢病毒介导的AP-1基因沉默可致卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制、凋亡增加，其机制可能
