养血安胎方通过RAGE通路调控EMT治疗复发性流产的作用机制

【摘要】 目的:探讨养血安胎方通过RAGE通路调控子宫内膜上皮间充质转化(EMT)治疗复发性流产(RSA)的作用机制。方法:使用原代分离培养的小鼠子宫内膜基质和上皮细胞,通过在细胞水平添加晚期糖基化终未产物(AGEs)的方法干预细胞,激活RAGE信号通路。进一步采用瞬时转染siRNA方法干预细胞,沉默细胞内源RAGE来抑制RAGE信号通路。使用荧光定量PCR、Westernblot实验方法检测干扰RAGE信号通路前后细胞内晚期糖基化终产物受体(RAGE)、Snail家族转录抑制因子1(Snail1)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、核因子-κB(NF-κB)信号通路上的标志蛋白的表达变化,从正反两个方面分析RAGE信号通路对小鼠子宫内膜基质细胞和子宫内膜上皮细胞EMT的影响。结果:与空白组比较,各给药组能够下调E-cadherin和闭合蛋白(Occludin)表达,上调Vimentin、N-cadherin、Snail1的表达。针对NF-κB通路检测也发现各给药组能够显著激活NF-κB信号通路