雷帕霉素-mTOR途径诱导自噬对抑制软骨细胞凋亡的影响
【摘要】 目的探讨雷帕霉素(rapamycinꎬRAPA)诱导软骨细胞自噬抑制骨关节炎(osteoarthritisꎬOA)进展的可能性ꎮ方法体外分离培养软骨细胞ꎬ应用地塞米松(dexamethasoneꎬDEX)诱导凋亡ꎬ然后用RAPA干预ꎮ将正常软骨细胞和OA软骨细胞分别分为3组:BSA组、DEX~BSA组、RAPA+DEX~BSA组ꎮMTT法检测软骨细胞活性ꎬGFP~RFP~LC3腺病毒、Western~Blot和实时荧光定量PCR(qRT~PCR)法检测自噬流水平和自噬相关蛋白LC3、Beclin1和ULK1蛋白及基因表达ꎮqRT~PCR和ELISA法检测IL~1、TNF~α浓度ꎮAnnexinV~FITC/PI法及TUNEL法检测凋亡ꎮ结果Western~Blot显示无论正常和OA软骨细胞ꎬ与DEX~BSA组比较ꎬRAPA+DEX~BSA组总LC3B、LC3B~Ⅱ、Beclin1和ULK1表达显著增加[正常软骨细胞DEX~BSA组分别为(14
