液泡分选蛋白4B对骨关节炎软骨细胞凋亡的调控作用

【摘要】 目的:探讨液泡分选蛋白4B(VPS4B)对骨关节炎软骨细胞凋亡的调控作用。方法:通过内侧半月板部分切除加前交叉韧带切断的方法建立骨关节炎SD大鼠模型,通过RT-PCR和免疫组化检测VPS4B在大鼠关节软骨中的表达。番红O/固绿染色方法检测大鼠膝关节软骨组织形态变化。通过用10ng/mL的IL-1β诱导人软骨肉瘤细胞SW135324h来模拟骨关节炎样软骨细胞损伤,Westernblot检测SW1353细胞中VPS4B、凋亡相关因子(cleavedcaspase-3和cleavedPARP)和磷酸化p38的表达。转染si-RNA敲低SW1353细胞中VPS4B表达,并评估其对IL-1β诱导的SW1353细胞凋亡标记和p38MAPK信号通路的影响。膜联蛋白V(AnnexinV)和碘化丙啶(PI)染色用于检测软骨细胞凋亡。结果:VPS4B在模型组大鼠的关节软骨中明显上调(P<0.05)。IL-1β诱导24h后,SW1353细胞中的VPS4B、cleavedcaspase-3、cleavedPARP和p-p38蛋白表达水平均明显增加。而转染VPS4B-siRNA敲低VPS4B的表达后,cleav