上调环状RNA_8199表达对食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
【摘要】 目的:探讨上调环状RNA_8199表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测ESCC细胞系KYSE520中环状RNA_8199的表达;Sanger测序对环状RNA_8199反向剪接位点的PCR产物进行验证;将KYSE520细胞中提取的RNA分为RNaseR处理组与对照组，RNaseR处理组用20URNaseR处理，对照组用等量双蒸水替代，qRT-PCR法分别检测两组环状RNA_8199和ATXN10mRNA的表达情况;采用细胞免疫荧光法和核浆分离法观察环状RNA_8199在ESCC细胞系KYSE520和KYSE270中的亚定位;将高表达环状RNA_8199的质粒载体(环状RNA_8199-OE)或阴性对照(环状RNA_8199-NC)分别转染到KYSE30和KYSE70细胞中，采用CCK-8和平板克隆形成实验测定细胞增殖能力，Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力。结果:RT-PCR实验证明环状RNA_8199通过发散引物只能扩增出细胞的反转录产物cDNA，而线性转录本通过聚合引物能同时扩增出cDNA和基因组DNA;Sanger测序证实
