HBV阿德福韦酯耐药位点基因突变检测方法的建立
【摘要】 目的探究并评价Taqman锁核酸（Lockednucleicacid，LNA）探针实时荧光聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction，PCR）在检测乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）感染患者阿德福韦酯（Adefovirdipivoxil，ADV）耐药位点基因突变中的应用价值。方法通过基因测序筛选阳性样本，进而构建ADV重组质粒标准品、标准曲线等，以构建的重组质粒为标准品建立实时荧光定量PCR反应体系，评价其线性范围、扩增效率、灵敏度及重复性等指标。结果rtA181V、rtN236T位点野生型和突变型重组质粒被成功构建;Taqman-LNA荧光PCR检测的线性范围为1×109/μl~1×102/μl;rtA181V、rtN236T位点野生型及突变型质粒标准品的扩增效率均高于75;rtA181V
