茄科劳尔氏菌单克隆抗体的制备及其特性鉴定

【摘要】 茄科劳尔氏菌(Ralstoniasolanacearum,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)筛选出3株能稳定分泌抗茄科劳尔氏菌株1.76的单克隆杂交瘤细胞株1C1、1B3和9D7。然后利用小鼠体内诱生腹水,1C1、1B3和9D7效价分别为11024000、164000、1256000。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,经SDS-PAGE鉴定显示纯化后的单克隆抗体(MonoclonalAntibodies,mAb)纯度较高。纯化后单克隆抗体(2mg/mL)效价分别为117529、135819、150000,抗体亚型均为IgG1。对3株抗体进行特异性检测结果显示,1C1和9D7均不能