内皮祖细胞DNA羟甲基化修饰在糖尿病血管并发症发病中的作用及其机制
【摘要】 目的:检测糖尿病患者外周血内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)黏附功能及其DNA的羟甲基化水平，并探讨DNA羟甲基化水平与糖尿病血管并发症患者EPCs功能的关系。方法:采用梯度离心法分离30例健康志愿者(正常对照组)和30例2型糖尿病伴有血管并发症患者(糖尿病组)的外周血单个核细胞，并利用EBM-2培养基将其诱导分化为EPCs。检测细胞黏附纤维蛋白的能力判断EPCs的功能是否异常。采用DNA提取试剂盒提取EPCsDNA，通过液相色谱串联质谱分析法测定5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)和5-甲基胞嘧啶(5mC)含量，判断EPCsDNA的羟甲基化水平。结果:与正常对照组相比，糖尿病组EPCs的黏附能力显著下降(P<0.05);EPCsDNA的羟甲基化修饰水平明显提高;5hmC和5mC含量显著下降(P<0.01及P<0.05)，两者的比值明显降低(P<0.05)。结论:糖尿病伴血管并发症患者的外周血EPCs功能显著下降，可能与DNA羟甲基化修饰有关，提示DNA羟甲基化修饰导致EPCs功能下降可能是糖尿病血管并发症发生的重要机制。
