核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在脓毒症急性肾损伤大鼠肾脏组织的表达及其影响
【摘要】 目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NLRP3）炎性小体在脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠中的作用及其机制。方法采用随机数字表法将18只雄性Wistar大鼠分为脂多糖（LPS）组、LPS+抑制剂组及阴性对照组3组，每组6只。LPS组大鼠给予腹腔内注射LPS（3.5mg/kg），LPS+抑制剂组大鼠腹腔内注射LPS（3.5mg/kg）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase鄄1）抑制剂Belnacasan（VX鄄765，100mg/kg），而阴性对照组大鼠则给予腹腔内注射0.3mL等渗NaCl溶液。比较3组大鼠建模前及建模后24h血清肌酐水平变化，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测3组大鼠建模24h后血清白细胞介素1茁（IL鄄1茁）、IL鄄18及肿瘤坏死因子琢（TNF鄄琢）表达水平，采用Western鄄blotting检测3组大鼠建模24h后NLRP3及Caspase鄄1蛋白表达水平。结果3组大鼠建模前后血清肌酐水平比较，差异有统计学意义（F=146.910，P约0.001）。进一步两两比较发现，建模后，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠血清肌酐水平均较LPS组显著降低[（1.57依0.20）、（0.54依0.39）、（2.31依0.24）mg/L]，且阴性对照组大鼠血清肌酐水平较LPS+抑制剂组更低（P均<0.05）;而LPS组[（2.31依0.24）mg/Lvs.（0.53依0.16）mg/L]及LPS+抑制剂组[（1.57依0.20）mg/Lvs.（0.56依0.08）mg/L]大鼠建模后血清肌酐水平均较建模前显著升高（P均<0.05）。LPS组、LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL鄄1茁[（9.33依1.16）、（1.93依0.30）、（1.88依0.30）ng/L]、IL鄄18[（23.8依2.8）、（19.6依1.5）（16.6依1.2）ng/L]、TNF鄄琢[（42.3依2.1）、（23.9依2.5）、（23.5依1.3）ng/L]及NLRP3蛋白[（2.04依0.25）、（2.04依0.27）、（1.49依0.28）]和Caspase鄄1蛋白[（0.62依0.07）、（0.51依0.09）、（0.50依0.09）]表达水平比较，差异均有统计学意义（F=217.015、20.590、168.766、8.723、3.905，P均<0.05）。进一步两两比较发现，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢表达水平均较LPS组大鼠显著降低，且阴性对照组大鼠IL鄄18表达水平较LPS+抑制剂组更低（P均<0.05）。阴性对照组大鼠NLRP3蛋白表达水平均较LPS组及LPS+抑制剂组显著降低，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠Caspase鄄1蛋白表达水平均较LPS组显著降低（P均<0.05）。结论大鼠发生脓毒症时，通过激活炎性小体NLRP3，进而通过Caspase鄄1通路造成急性肾损伤。[关键词]脓毒症;核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3;急性肾损伤鄄likereceptorprotein3inflammasomeZhangJiannan,LiuWen,ChangDepartmentofCriticalCareMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofToinvestigatetheroleandmechanismofnucleotide(NLRP3)inflammasomeinsepticratswithacutebindingEffectofnucleotidebindingoligomerizationdomainonkidneytissuesinsepticratswithacutekidneyinjuryGuangping,CaoYanhui.HarbinMedicalUniversity,150001Harbin,ChinaCorrespondingauthor:CaoYanhui,Email:icucaoyanhui@126.com[Abstract]Objectiveoligomerizationdomain鄄likereceptorprotein3鄄6880.2020.01.011DOI:10.3877/cma.j.issn.1674基金项目:黑龙江省卫生计生委科研课题（2017鄄041）作者单位:150001哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第一医院重症医学科通信作者:曹延会，Email:icucaoyanhui@126.com56··鄄1(Caspase鄄1)inhibitorBernacasan(3.5mg/kg),and(VX鄄765,100mg/kg),TheexpressionlevelsofseruminterleukinInthemeantime,theexpressionlevelsof鄄blottingaftermodelingfor24h.(AKI).MethodsAtotalof18maleWistarratswererandomlydividedintoa鄄1beta(IL鄄1茁),IL鄄18,and鄄linkedResults中华危重症医学杂志（电子版）2020年2月第13卷第1期ChinJCritCareMed(ElectronicEdition),February2020,Vol.13,No.1kidneyinjurylipopolysaccharide(LPS)group,aLPS+inhibitorgroup,andanegativecontrolgroup,6ineachgroup.RatsintheLPSgroupweregivenanintraperitonealinjectionofLPSratsintheLPS+inhibitorgroupweregivenanintraperitonealinjectionofLPS(3.5mg/kg)andcysteinylaspartatespecificproteinasewhileratsinthenegativecontrolgroupweregivenanintraperitonealinjectionofisotonicNaClSerumcreatininelevelsofratsinthe3groupswerecomparedbeforeandsolution(0.3mL).aftermodelingfor24h.tumornecrosisfactor鄄alpha(TNF鄄琢)ofratsinthe3groupsweremeasuredbyenzymeimmunosorbentassay(ELISA)aftermodelingfor24h.鄄1proteinsweredetectedbyWesternNLRP3andCaspaseTheserumcreatininelevelsofratsinthe3groupswerestatisticallysignificantlydifferentbeforeandaftermodeling(F=146.910,P<0.001).modeling,theserumcreatininelevelsintheLPS+inhibitorgroupandnegativecontrolgroupwerebothsignificantlylowerthanthoseintheLPSgroup[(1.570.24)mg/L],andtheserumcreatininelevelinthenegativecontrolgroup(1.57依0.20)mg/L]waslowerthanthatintheLPS+inhibitorgroup,whereastheserumcreatininelevelsintheLPSgroup[(1.57依0.20)mg/Lvs.thosebeforemodeling(all0.30),(1.88依0.30)ng/L],IL鄄18[(23.8依2.8),(19.6依1.5),(16.6依1.2)ng/L],TNF(23.9依2.5),(2.04依0.27),Caspase鄄1proteins[(0.62amongtheLPSgroup,LPS+inhibitorgroupandnegativecontrolgroupFurthercomparisonsshowedthattheserumlevelsofIL168.766,8.723,3.905;allP<0.05).1茁,IL鄄18,andTNF鄄琢intheLPS+inhibitorgroupandnegativecontrolgroupweresignificantly鄄18levelinthenegativecontrolwaslowerthanlowerthanthoseintheLPSgroup,andtheILthatintheLPS+inhibitorgroupThelevelsofNLRP3proteininthenegativecontrolgroupweresignificantlylowerthanthosebothintheLPSgroupandtheLPS+inhibitorgroup(bothinhibitorgroupandnegativecontrolgroupwerebothsignificantlylowerthanthoseintheLPSgroup(bothP<0.05).ConclusionInsepticrats,theNLRP3inflammasomeisactivatedandthenacutekidneydamageoccursthroughtheCaspaseAcutekidneyinjury鄄1茁[(9.33依1.16),(1.93依鄄琢[(42.3依2.1),(1.49依0.28)],and依0.07),(0.51依0.09),(0.50依0.09)]werestatisticallysignificantlydifferent(F=217.015,20.590,[(2.31依0.24)mg/Lvs.(0.56依0.08)mg/L]aftermodelingwerebothsignificantlyhigherthanP<0.05).TheexpressionlevelsofserumIL(0.53依0.16)mg/L]andLPS+inhibitorgroup[Keywords]Sepsis;Nucleotidebindingoligomerizationdomain依0.20),(0.54依0.39),(2.31依[(0.54依0.39)mg/Lvs.P<0.05).Inaddition,theexpressionlevelsofCaspase鄄1proteinintheLPS+鄄1pathway.鄄likereceptorprotein3;(23.5依1.3)ng/L],NLRP3proteins[(2.04依0.25),Furtherpairwisecomparisonsshowedthatafter鄄(allP<0.05).脓毒症是由感染引起宿主反应失调而导致危及复合物---炎性小体作为固有的免疫系统感受器，生命的器官功能障碍，严重时进展为严重脓毒症及能够识别各种危险信号，从而启动下游信号途径，促脓毒性休克。其中肾脏为最常受累的器官，常导致急性肾损伤（acutekidneyinjury，AKI），是ICU患者死亡的重要原因之一。研究表明，ICU中AKI的发病率为30%~50%，其中半数以上均由脓毒症引起，而由脓毒症引发的AKI病死率高达50%[1]。因此，脓毒症成为近年来ICU领域研究的热点和难点，但其发病机制尚有待研究。有学者指出，AKI是对感染性激活物产生的免疫应答[2]。核苷酸结合寡聚化结构域样受体（nucleotidebindingoligomerizationdomain鄄likereceptor，NLR）及其形成的多蛋白水解进细胞活化、细胞因子释放，激活多种炎症因子，造成肾脏损伤[3]。研究发现，NLR蛋白3（NLRprotein3，NLRP3）是参与肾脏炎症反应的重要指标，可通过活化下游半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（cysteinylaspartatespecificproteinase鄄1，Caspase鄄1）信号进而激活白细胞介素1茁（interleukin鄄1beta，IL鄄1茁）、IL鄄18及肿瘤坏死因子琢（tumornecrosisfactor鄄alpha，TNF鄄琢）等炎症因子，造成组织损伤[4鄄6]。为此，本研究通过建立大鼠AKI模型，探讨NLRP3炎性小体在脓毒症AKI中的作用机制。中华危重症医学杂志（电子版）2020年2月第13卷第1期ChinJCritCareMed(ElectronicEdition),February2020,Vol.13,No.11材料与方法1.1实验试剂剂57··浓度;加入上样缓冲液，煮沸使蛋白变性，置于-80益冰箱保存备用，采用Western鄄blotting法进行检测。其中，NLRP3、Caspase鄄1一抗浓度均为1颐500，内参GAPDH浓度为1颐1000，二抗浓度均为1颐2000。最后，应用ImageJ2.1软件对条带进行分析。1.6统计学方法采用SPSS20.0统计学软件进行分析，计量资料以均数依标准差（x軃依s）表示，3组大鼠建模前后血清肌酐水平比较采用两因素方差分析，而血清IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢及NLRP3蛋白和Caspase鄄1蛋白较采用LSD鄄t检验，以P约0.05为差异有统计学表达水平比较采用单因素方差分析，进一步两两比意义。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、Caspase鄄1抑制剂Belnacasan（VX鄄765）购自美国Sigma公司;兔抗大鼠NLRP3抗体（1颐500）、Caspase鄄1抗体（1颐500）、甘油醛鄄3鄄磷酸脱氢酶（glyceraldehyde鄄3鄄phosphatedehydrogenase，GAPDH）（1颐1000）及辣根过氧化物酶标记免疫球蛋白G（immunoglobulinG，IgG）二抗（1颐2000）均购自英国Abcam公司;IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢的酶联免疫吸附测定（enzyme鄄linkedimmunosorbentassay，ELISA）试剂盒，二喹啉甲酸（bicinchoninicacid，BCA）蛋白定量试剂盒及蛋白电泳试剂盒均购自上海碧云天公司。本研究已经通过医院伦理委员会审核。1.2脓毒症AKI模型的建立及分组选取8周龄雄性Wistar大鼠18只，体质量（200依20）g，由哈尔滨医科大学动物实验中心提供，许可证号:SYXK（黑）2017鄄008。采用随机数字表法将18只大鼠分为LPS组、LPS+抑制剂组及阴性对照组3组，每组6只。LPS组大鼠给予腹腔内注射LPS（3.5mg/kg），建立脓毒症AKI模型;LPS+抑制剂组大鼠给予腹腔内注射LPS（3.5mg/kg），2h后确定建模成功，再给予VX鄄765（100mg/kg）;阴性对照组大鼠则给予腹腔内注射0.3mL等渗NaCl溶液作为对照。3组大鼠均在25益恒温动物房中单笼饲养，12h光照和12h黑暗交替，自由进食标准颗粒饲料及饮水。24h后取动物标本进行检测。1.3血清肌酐水平测定分别于建模前和建模后24h抽取大鼠尾静脉血，3000r/min离心15min，离心半径为10cm，取血清1mL，应用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐水平。1.4血清IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢检测建模后24h取大鼠尾静脉血，3000r/min离心15min，离心半径为10cm，取上清1mL，根据ELISA试剂盒说明书进行操作，显色后使用酶标仪测定IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢在450nm处的吸光度值。1.5NLRP3、Caspase鄄1蛋白表达水平检测建模24h后断髓处死大鼠，由腹主动脉注入4益的等渗NaCl溶液对肾脏进行冲洗，直至肾脏变白，均取右肾组织剪碎，按10颐1的标准加入放射免疫沉淀法（radioimmunoprecipitationassay，RIPA）裂解液和磷酸酶抑制剂，匀浆后采用BCA法测定蛋白2结果2.1建模前后血清肌酐水平比较组大鼠建模后血清肌酐水平均较建模前显著升高3组大鼠建模前后血清肌酐水平比较，差异有统计学意义（F=146.910，P约0.001）。进一步两两比较发现，3组大鼠建模前血清肌酐水平比较，差异均无统计学意义（P均>0.05）;建模后，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠血清肌酐水平均较LPS组显著降低，且阴性对照组大鼠血清肌酐水平较LPS+抑制剂组更低（P均<0.05）;LPS组及LPS+抑制剂（P均<0.05），而阴性对照组大鼠建模前后血清肌酐水平比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。提示脓毒症AKI模型建模成功。（mg/L，x軃依s）0.53依0.160.56依0.080.53依0.103组大鼠建模前后血清肌酐表达水平比较2.31依0.24a1.57依0.20ab0.54依0.39bcLPS+抑制剂组LPS组F值P值注:LPS.脂多糖;与同组建模前比较，aP<0.05;与LPS组比较，bP<0.05;与LPS+抑制剂组比较，cP<0.052.2血清IL鄄1茁、IL鄄18和TNF鄄琢表达水平比较146.910<0.001阴性对照组表1建模后组别例数建模前6663组大鼠血清IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢表达水平比较，差异均有统计学意义（F=217.015、20.590、168.766，P均<0.001）。进一步两两比较发现，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢表达水平均较LPS组大鼠显著降低，且阴性对照组大鼠IL鄄18表达水平较LPS+抑制剂组更低（P均<0.05），见表2。中华危重症医学杂志（电子版）2020年2月第13卷第1期ChinJCritCareMed(ElectronicEdition),February2020,Vol.13,No.158··3组大鼠IL鄄1茁、IL鄄18和TNF鄄琢表达水平比较（ng/L，x軃依s）表2例数666组别LPS组F值P值LPS+抑制剂组阴性对照组IL鄄1823.8依2.819.6依1.5a16.6依1.2ab20.590<0.0012.3NLRP3、Caspase鄄1蛋白表达水平比较IL鄄1茁9.33依1.161.93依0.30a1.88依0.30a217.015<0.001此，本研究通过建立大鼠脓毒症AKI模型，检测脓毒症AKI大鼠中NLRP3及其他炎症指标的表达水平，发现脓毒症AKI可激活NLRP3，进而通过Caspase鄄1启动一系列炎症反应信号，造成肾脏组织损伤，为脓毒症AKI的研究提供实验依据[13]。TNF鄄琢42.3依2.123.9依2.5a23.5依1.3a168.766<0.001注:IL鄄1茁.白细胞介素1茁;TNF鄄琢.肿瘤坏死因子琢;LPS.脂多糖;与LPS组比较，aP<0.05;与LPS+抑制剂组比较，bP<0.053组大鼠NLRP3、Caspase鄄1蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（F=8.723、3.905，P=0.003、0.043）。进一步两两比较发现，阴性对照组大鼠NLRP3蛋白表达水平均较LPS组及LPS+抑制剂组显著降低，LPS+抑制剂组及阴性对照组大鼠Caspase鄄1蛋白表达水平均较LPS组显著降低（P均<0.05）;而LPS+抑制剂组大鼠NLRP3蛋白表达水平与LPS组比较，差异无统计学意义，阴性对照组大鼠Caspase鄄1蛋白表达水平与LPS+抑制剂组比较，差异亦无统计学意义（P均>0.05），见表3。3组大鼠NLRP3、Caspase鄄1蛋白比较（x軃依s）Caspase鄄10.62依0.070.51依0.09a0.50依0.09a3.9050.043NLRP32.04依0.252.04依0.271.49依0.28ab8.7230.003炎性小体作为胞内模式识别受体，在激发和调LPS+抑制剂组阴性对照组表3组别LPS组例数666节长期免疫及炎症反应中起着重要的调控作用。NLRP3炎性小体是由细胞内多种分子蛋白组成的复合体，在静止状态通常包含NLRs、细胞凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis鄄associatedspeck鄄likeproteincontainingacaspase鄄recruitmentdomain，ASC）和pro鄄Caspase鄄1[14]。NLRs是病原体及危险信号感受器，当感受到外界刺激时，NLRP3结构发生改变，ASC及pro鄄Caspase鄄1解聚，pro鄄Caspase鄄1通过自我剪切形成活性Caspase鄄1，进而激活IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢等炎症因子，攻击病原体及相关组织[15鄄22]。本研究通过腹腔注射LPS建立脓毒症AKI模型，通过检测血肌酐水平评价模型成功与否，建模后LPS组及LPS+抑制剂组大鼠NLRP3表达水平均较阴性对照组显著增高，说明AKI能够激活NLRP3炎性小体，进而增加Caspase鄄1的表达。Caspase鄄1的增加启动炎症反应，而加入Caspase鄄1抑制剂VX鄄765后相关炎症因子IL鄄1茁、IL鄄18及TNF鄄琢水平明显下降，提示Caspase鄄1是IL鄄1茁、IL鄄18及TNF鄄琢的启动因子。Caspase鄄1是一种半胱氨酸蛋白酶，参与诱导细胞凋亡，通过IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢发挥促炎作用，本研究提示脓毒症AKI可通过NLRP3-Caspase鄄1-IL鄄1茁、IL鄄18、TNF鄄琢这一信号通路发挥组织损伤的作用。IL鄄18是由抗原呈递细胞和T淋巴细胞（例如巨噬细胞、树突状细胞和CD4+T淋巴细胞）产生的促介体。本研究中，LPS+抑制剂组IL鄄18表达水平虽较LPS组显著降低，但较阴性对照组显著升高，提示IL鄄18可能通过其他途径被激活。IL鄄18和其他炎症细胞因子在LPS诱导的AKI中起重要作用，可作为今后AKI相关发生机制研究的方向。综上所述，炎细胞因子，也是内毒素血症引起器官衰竭的重要F值P值注:NLRP3.核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3;Caspase鄄1.半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1;与LPS组比较，aP<0.05;与LPS+抑制剂组比较，bP<0.053讨论脓毒症是ICU常见疾病，其患病率及病死率逐年增高，尤其合并AKI者，已成为ICU死亡的重要原因之一[7鄄8]。目前脓毒症AKI的治疗方法主要是液体复苏及血管活性药物，目的是恢复肾脏血流量。然而，相关研究表明，即使早期有效地恢复肾脏血流，仍不能纠正AKI的发生[9]。有学者指出，脓毒症AKI的发病机制复杂，与炎症反应、缺血再灌注损伤、线粒体氧化应激等诸多因素密切相关[10鄄12]。本课题组预实验结果显示，一次向大鼠腹腔注活动变少，竖毛，并有发热、呼吸加快等症状，处死后射3.5mg/kg的LPS，2h后大鼠即出现精神变化，取出肾脏见皮质苍白，髓质暗红，肾组织经苏木素鄄伊红染色可见肾小球肿胀，肾小管上皮细胞凋亡，空泡变性，间质大量炎症细胞浸润，提示建模成功。因中华危重症医学杂志（电子版）2020年2月第13卷第1期ChinJCritCareMed(ElectronicEdition),February2020,Vol.13,No.1大鼠发生脓毒症时，可激活炎性小体NLRP3，进而通过Caspase鄄1通路造成组织损伤。59··鄄inducedacute鄄参考文献Campaign:SurvivingforadministrationtoFrontImmunol,2018(9):5DellingerRP,LevyMM,CarletJM,etal.international鄄327.EarlyvitaminCpatientswithseptic鄄basedJClin1刘晓原，裴源源，朱继红.脓毒性休克致急性肾损伤患者的危险因素分析[J/CD].中华危重症医学杂志（电子版），2018，11（6）:366鄄371.2玄红运，王彩丽.炎症小体NOD样受体蛋白3与肾脏疾病的研究进展[J].新医学，2018，49（9）:628鄄632.3姜华，闫宜青，江维，等.NLRP3炎症小体活化、调控机制及相关疾病机制[J].中国科学:生命科学，2017，47（1）:125鄄131.Inflammasome鄄ind鄄4KimSM,KimYG,KimDJ,etal.ependentofNLRP3mediatesmitochondrialroleregulationinrenalinjury[J].2563.Sepsisguidelinesmanagementofseveresepsisandsepticshock:2008[J].CritCareMed,2008,36(1):2966ShinTG,KimYJ,RyooSM,etal.andthiamineshockinemergencydepartments:propensityscoreanalysisofabefore鄄and鄄aftercohortstudy[J].Med,2019,8(1).7OppertM,EngelC,BrunkhorstFM,etal.AcuterenalfailureinpatientswithseveresepsisandsepticshockaindependentfactorresultsfromtheGermanPrevalenceStudy[J].DialTransplant,2008,23(3):904鄄909.SchrierRW,WangW.8[J].NEnglJMed,2004,351(2):159鄄169.Structureand9MaidenMJ,OttoS,BrealeyJK,etal.functionofthekidneyinsepticshock.Aprospectivecontrolledexperimentalstudy[J].CareMed,2016,194(6):69210UmbroI,GentileG,TintiF,etal.inpathophysiologyandbiomarkersofacutekidneyinjury[J].JInfect,2016,72142.attenuatesinhibitingactivation[J].CellDeathDis,2018,9(3):351.AmJRespirCritRecentadvancessepsis鄄induced(2):131鄄HydroxychloroquinebyrenalcathepsinmediatedNLRP3inflammasomeProtectiveeffects11TangTT,LvLL,PanMM,etal.ischemia12ZhaoWY,ZhangL,SuiMX,etal.鄄鄄formortality:NephrolAcuterenalfailureandsepsisreperfusionsignificantinjury鄄700.risk/by17鄄426.16YanY,JiangW,LiuL,etal.inflammation18YoumYH,NguyenKY,GrantRW,etal.茁鄄hydroxybutyrate13KomadaT,UsuiF,KawashimaA,etal.RoleofNSciRep,2015(5):10901.ofsirtuin3inamurinemodelofsepsiskidneyinjury[J].SciRep,2016(6):33201.LRP3inflammasomesforrhabdomyolysis鄄inducedacutekidneyinjury[J].14MartinonF,BurnsK,TschoppJ.Theinflammasome:amolecularplatformtriggeringactivationofinflammatorycaspasesandprocessingofproILMolCell,鄄beta[J].2002,10(2):41715MariathasanS,WeissDS,NewtonK,etal.Cryopyrinactivatestheinflammasomeinresponsetotoxinsand鄄232.ATP[J].Nature,2006,440(7081):228Dopaminecontrolssy鄄inhibitionstemicthroughofNLRP3inflammasome[J].Cell,2015,160(1鄄2):62鄄73.ActivationofShiCS,ShenderovK,HuangNN,etal.autophagyinflammatorysignalslimitsIL鄄1茁productionbytargetingubiquitinatedinflammasomesfordestruction[J].NatImmunol,2012,13(3):255metaboliteblocksinflammasome鄄mediatedinflammatorydisease[J].Med,2015,21(3):263activatedinAlzheimer'sdiseaseandpathologyinAPP/PS1mice[J].(7434):674鄄678.20WangP,HuangJ,LiY,etal.monoxidedecreasessepsisandinhibitsNLRP3inflammasomeactivationinrats[J].IntJMolSci,2015,16(9):20595TNF鄄alphamediateschemokineandcytokineexpressionandrenalinjurycisplatinnephrotoxicity[J].JClinInvest,2002,110(6):835鄄842.22HookVY,KindyM,HookG.BimprovememorytransgenicAlzheimerdiseasemiceexpressingthewildtype,butnottheSwedishmutant,betatheamyloidprecursorprotein[J].283(12):7745鄄263.TheketoneNLRP3NatNLRP3iscontributestoNature,2013,493Exogenouscarbon鄄inducedacutekidneyinjuryInhibitorsofcathepsinbeta鄄amyloid鄄secretasesiteofJBiolChem,2008,19HenekaMT,KummerMP,StutzA,etal.21RameshG,ReevesWB.鄄20608.reduce鄄7753.鄄269.and鄄inin鄄（收稿日期:2019鄄09鄄15）（本文编辑:于莉）张建楠，刘文，昌广平，等.核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在脓毒症急性肾损伤大鼠肾脏组织的表达及其影响[J/CD].中华危重症医学杂志（电子版），2020，13（1）:55鄄59.
