不同核酸提取方法SARS-CoV-2核酸检测性能比较

【摘要】 目的比较磁珠吸附法和样本释放剂法对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测结果的符合率、重复性及检出限,优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法。方法采用2种核酸提取方法的3种商品化核酸提取试剂,分别对阴性样本、阳性样本及不同浓度(稀释度20~28)的SARS-CoV-2RNA标准品进行RNA提取及实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,以Ct值评价不同核酸提取方法的性能。结果3种核酸提取试剂的阴性和阳性样本结果符合率均为100%。使用磁珠吸附法进行核酸提取的变异系数(CV)(CV为0.89%~1.58%)低于样本释放剂法,样本释放剂B的CV(CV为0.83%~2.73%)次之,样本释放剂A的CV最大(CV为1.62%~4.90%)。磁珠吸附法及样本释放剂B提取核酸的检出限均为156.3拷贝/mL,样本释放剂A的检出限为625.0拷贝/mL。结论磁珠吸附法核酸提取试剂核酸提取效率高、重复性好,适合大批量样本的集中操作。