优化CD115稳定性因素以精确检测小鼠单核细胞及其亚群
【摘要】 单核细胞是机体防御系统的重要组成部分，单核细胞数量发生改变一定程度上可反映机体炎症或其他疾病状态。应用流式细胞术对单核细胞表面抗原进行检测，可了解单核细胞占比变化，有助于揭示单核细胞在疾病发生和转归中的作用。鉴于小鼠单核细胞特异性抗原CD115的稳定性较差，在流式检测过程中，对其影响因素进行优化，以确保检测结果的准确性。首先，探讨CD115抗原-抗体结合前后温度和放置时间对其影响及多聚甲醛（paraformalclehyde，PFA）固定对CD115稳定性的保持作用。在此基础上，通过组合流式抗体CD11c、CD49b、Ly6G、Ter119、CD3e和B220选定阴性细胞群，再用CD11b和CD115圈门得到双阳性的单核细胞，最后根据Ly6C表达强弱区分单细胞亚群。结果显示，温度和放置时间对小鼠单核细胞CD115的稳定性影响显著。将小鼠样本在冰上放置6h时，CD11b和CD115双阳性细胞比例仍保持稳定，在室温放置1h即明显下降，在37℃放置0.5h则大部分消失。该结果在抗体结合前后趋
