kdm4A在斑马鱼细胞低温胁迫过程中的作用
【摘要】 赖氨酸特异性去甲基化酶4A基因(lysinedemethylase4A,kdm4A)编码的蛋白具有去甲基化酶活性，并且在基因表达调控中起重要作用。该基因在斑马鱼中有两种类型kdm4aa和kdm4ab。本实验室前期对18℃低温胁迫下斑马鱼(Daniorerio)胚胎成纤维样细胞(zebrafishembryosfibroblastlikecellline,ZF4)的转录组数据分析发现kdm4aa表达量显著降低，但是该基因在鱼类低温胁迫下的作用仍不清楚。为了研究这两种Ⅰ酶切构建了pLKO.1-kdm4aa-shRNA、pLKO.基因在鱼类低温胁迫下的功能，本研究用EcoR1-kdm4ab-shRNA和pLKO.1-negativecontrol(nc)三种重组质粒，并分别与慢病毒包装质粒pCMV-DR8.9.1、pCMV-VSVG共同转染至293T细胞中，经293T细胞包装的病毒，感染斑马鱼ZF4细胞，RT-qPCR检测表明ZF4细胞中kdm4aa和kdm4ab均成功被敲降。随后将细胞于28℃培养
