马铃薯转录因子StTCP13基因的原核表达及盐胁迫功能研究

【摘要】 初探StTCP13基因在盐胁迫方面的功能ꎬ为StTCP13在马铃薯非生物逆境响应的功能研究奠定基础ꎮ采用同源克隆策略获得StTCP13基因编码区全长ꎬ利用生物信息学分析蛋白结构域并构建系统进化树ꎬqRT~PCR技术分析该基因表达模式ꎬ双酶切法构建StTCP13~pGEX6P1原核表达载体ꎬ利用大肠杆菌BL21表达StTCP13~GST标签融合蛋白ꎬ观察转StTCP13大肠杆菌BL21在盐胁迫培养基上的表型ꎮ结果显示ꎬ从马铃薯品种费乌瑞它中克隆得到了StTCP13基因ꎬ成功构建了StTCP13~GST标签融合蛋白的pGEX~6P~1原核表达载体ꎬ并在大肠杆菌BL21中诱导表达了目的蛋白ꎮ生物信息学分析结果表明ꎬ该基因CDS全长669bpꎬ编码一个由222个氨基酸组成的蛋白质ꎬ该蛋白质含有1个保守的TCP结构域ꎬ融合蛋白大小约为51kuꎮ系统进化树结果显示ꎬ马铃薯StTCP13与潘那利番茄SpTCP13、甜椒CaTCP13亲缘关系较近ꎮ表达分