转基因水稻E1C9K-18的获得及其事件特异性检测方法的建立

【摘要】 抗除草剂、抗螟虫水稻在方便杂草治理、减少虫害损失方面具有重要的应用价值。事件特异性检测方法是监管转基因水稻的必需技术。本研究构建了损伤诱导启动子驱动抗螟虫基因杀虫蛋白基因(genecodinginsecticidalcrystalproteinCry1Ca,Cry1Ca#)和组成型启动子驱动抗除草剂基因5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶基因(genecoding5-enolpyruvylshikimate3-phosphatesynthase,Epsps#)的植物表达载体,利用农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法转化籼稻(Oryzasativasubsp.indica)9K19-5,获得了单拷贝转化事件E1C9K-18,喷施草甘膦显示其具有良好的草甘膦抗性。利用高效热不对称交错PCR法(highefficientthermalasymmetricinterlacedPCR,hiTAIL-PCR)扩增获得了转基因水稻E1C9K-18外源基因插入位点的右旁侧序列420bp,其插在水稻基因组