金钱鱼催乳素基因SaPRL的克隆及原核表达
【摘要】 金钱鱼(Scatophagusargus)对水环境的盐度变化具有很强的适应能力。为了解该鱼的催乳素基因(SaPRL)在其渗透压调节过程中所起到的作用，本研究采用RACE技术，对SaPRL基因进行了全长cDNA序列的克隆及序列分析。结果表明，SaPRL的cDNA序列全长为1550bp，可编码212个氨基酸，具有与其他物种共同的保守区域Growthhormonelikesuperfamily;在氨基酸序列上，它与黑棘鲷(Acanthopagrusschlegelii)的催乳素基因(PRL)相似性较高，达82%，而与人(Homosapiens)的PRL的相似性仅为39%。用半定量法(sq-PCR)进行组织分布分析显示，在盐度为2.5%的海水中，金钱鱼SaPRL基因主要于脑和垂体中有高丰度表达。此外，SaPRL主要分布在金钱鱼脑组织的脑膜中。最后，本研究成功构建了SaPRL-pET28a(+)原核表达质粒，当在含该质粒的宿主菌中加入1mmol/L的IPTG并以32℃诱导4h后，能获得大量融合蛋白的表达
