金龙胆草油菜素内酯合成途径C-23羟化酶基因的克隆及分析
【摘要】 油菜素内酯具有促进植物生长、增加产量和提高植物抗逆性等作用。本研究以中草药金龙胆草(Conyzablinii)为研究对象，克隆分析其油菜素内酯合成途径C-23羟化酶(CYP90C1/ROT3)基因。根据金龙胆草叶片转录组数据，克隆获得了一条全长1512bp的ROT3基因cDNA序列，编码504个氨基酸，命名为CbROT3，GenBank登录号为KX907782;通过生物信息学工具分析其分子特征表明CbROT3氨基酸序列与向日葵(Helianthusannuus)ROT3的相似性达87%，系统进化树分析结果也与之相吻合;该基因蛋白相对分子质量为57.51kD，等电点为7.59，为亲水性蛋白，具有一个跨膜结构，无信号肽序列;摸索其原核表达条件，发现在22℃、0.6mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导条件下可获得最大量的可溶性目的蛋白。本研究结果对提高金龙胆草内源油菜素内酯含量，调控金龙胆草生长发育和增加金龙胆草抗逆性提
